杨永健, 祝善俊, 祝之明, 胡厚祥, 丁钢. 转染血管紧张素Ⅱ受体反义核苷酸对心肌成纤维细胞的作用[J]. 心脏杂志, 2000, (06). DOI: 10.13191/j.chj.2000.06.3.yangyj.001
    引用本文: 杨永健, 祝善俊, 祝之明, 胡厚祥, 丁钢. 转染血管紧张素Ⅱ受体反义核苷酸对心肌成纤维细胞的作用[J]. 心脏杂志, 2000, (06). DOI: 10.13191/j.chj.2000.06.3.yangyj.001

    转染血管紧张素Ⅱ受体反义核苷酸对心肌成纤维细胞的作用

    • 摘要: 目的 :评价转染血管紧张素 (Ang )受体 (AT1 )反义核苷酸 (AT1 A)对心肌成纤维细胞 (Fbs) Ang 受体亚型 m RNA、蛋白激酶 C(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶 P38(P38MAPK)蛋白表达 ,及蛋白质合成的作用。方法 :RT-PCR克隆 AT1 c DNA片段 (4 76 bp) ,将克隆的 AT1 c DNA片段反向插入 Pc DNA 3.1(5 .4kb) ,构建一完整的含AT1 A的质粒 (PAT1 A)。转染培养的大鼠 Fbs,RT- PCR检测转染的 Fbs AT1 m RNA表达。 Ang 10 - 7m ol/ L 刺激 2 4h后 ,比较转染及非转染的 Fas Ang 受体 AT1 及 AT2 m RNA表达 (RT- PCR)、P38MAPK和 PKC蛋白表达(western blot)、蛋白质合成 (3H- L eu掺入 )。结果 :成功构建 PAT1 A。 RT- PCR显示转染 Fbs AT1 m RNA的水平降低 ,与对照 Fbs相比差异显著 (P<0 .0 1)。 Ang 10 - 7m ol/ L 刺激 2 4h后 ,与非转染 Fbs相比 ,转染 Fbs AT1m RNA明显减少 ,AT2 m RNA明显增加 (P<0 .0 1) ;但两组间 PKC和 P38MAPK蛋白表达、3H- L eu及 3H- Td R掺入量均无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 :经 AT1 A封闭后 ,能显著地抑制 Fbs AT1 m RNA表达 ,同时上调 AT1 m RNA。单纯封闭 AT1 m RNA并不能有效阻断 Ang 介导的 Fbs蛋白质合成及 Fbs生长相关的信号转导。 

       

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